在纽约自然博物馆重新焕然一新之际，博物小保安赖瑞·戴利（本·斯蒂勒 饰）策划了一场别开生面的馆奇开幕演出，希望为博物馆增添一抹神秘色彩。妙夜然而，博物随着泰迪·罗斯福（罗宾·威廉姆斯 饰）、馆奇猴子以及其他稀奇古怪的妙夜藏品陆续登场，一场前所未有的博物混乱随即上演。赖瑞发现博物馆的馆奇核心文物——复活黄金碑正遭到不明物质侵蚀，而这似乎与藏品们的妙夜异常行为息息相关。为了揭开背后的博物秘密并阻止灾难的发生，赖瑞决定前往大英博物馆寻求帮助，馆奇并邀请法老王阿卡曼拉的妙夜父亲一同前往。旅途中，博物他们偶遇了勇敢的馆奇圆桌骑士兰斯洛特爵士，并且与屋大维等伙伴失散，妙夜踏上了一场充满未知和挑战的奇妙冒险。在夜幕下的大英博物馆中，赖瑞和他的朋友们不仅要面对时间紧迫的压力，还要克服重重困难解开谜题。这场惊心动魄的旅程不仅考验着他们的智慧与勇气，更让他们意识到，真正的友谊与信任是无价之宝。随着探险深入，他们将发现关于古老文明和现代奇迹之间错综复杂的关系，而这些都将决定博物馆乃至整个城市的未来命运。
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